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ELISA試劑盒操作說明：

1、封板膜只做一次性使用。 

2、標本中待測物質(zhì)含量過高時先將樣本稀釋一定倍數(shù)后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

3、各步加樣均使用加樣器，并經(jīng)常校對其正確性，一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)。

4、液體標本置4℃保存應小于1周，-20℃。

ELISA試劑盒洗板時還應注意以下問題：

1、需每天校正注液量及殘液量，洗滌后殘液量不得大于2μl；

2、及時更換破損吸液針，避免破壞底板包被；

3、針對不同廠家酶標板注意調(diào)整吸液頭下降高度，避免沖洗針頭卡住酶標板；

4、注意調(diào)整洗液量，洗液量過多將溢出，過少將達不到洗滌效果；

5、關機前使用蒸餾水沖洗管道，避免洗液的結晶物堵塞管道；

6、不同種試劑盒的洗液嚴禁混合使用。

ELISA試劑盒注意事項：

1．邊緣效應 使用96孔板的ELISA測定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應"，即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應"，并且可提高測定的重復性。

2．加樣在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關鍵點是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應液界面有差異。所以，有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。

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